以病毒rna核转运为靶点的抗hiv-1药物筛选模型的建立及应用

目前,临床使用的抗aids一线药物主要是hiv逆转录酶抑制剂和蛋白质酶抑制剂。但是,由于这类药物价格昂贵、严重的副作用、毒性、耐药性等问题日益严重,发展新作用机制的抗hiv-1药物已成当务之急。因此,本课题以hiv-1病毒rna核转运关键蛋白rev为靶点,建立了新型抗hiv药物筛选模型,以期寻找具有新作用机制的抗病毒药物。在筛选模型中,选择了由hiv-1病毒偏爱性密码子所编码的gfp(gfphiv)作为报告基因,用于快速简便地分析样品对rev依赖的rna核转运的影响。选取抑制剂来普霉素b作为模型的阳性对照对本模型进行了初步评价,计算出z'因子为0.8220。上述结果初步证明了该模型可用于新型抗hiv药物的筛选。对3000个化合物进行初筛,阳性率为9.3%,复筛阳性率为7.3%。通过抗病毒活性的测定实验以及对阳性化合物进行免疫印迹检测,最后发现imb7c7这个化合物以病毒rna核转运为靶点,是具有较好效果的特异性抑制剂。