聚乙烯亚胺介导sirna分子体内外基因沉默vegfr2表达

应用阳离子聚合物聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,pei)包裹靶向小鼠vegfr2基因的sirna分子,以研究其体外基因沉默作用及不同给药途径的肿瘤生长抑制作用。采用共聚焦显微镜观察荧光染料cy3标记的sirna分子的细胞内定位,rt-pcr和westernblotting检测vegfr2mrna和蛋白表达水平基因沉默效果,建立裸鼠皮下肿瘤模型比较经瘤内和尾静脉给予sivegfr2/pei抑制肿瘤生长的作用。共聚焦显微镜观察证实pei能成功转染sirna分子进入细胞质,sivegfr2/pei转染的ms1细胞中vegfr2mrna和蛋白表达水平明显下降,沉默效率分别为28.2%和23.6%。瘤内给与sivegfr2/pei组裸鼠肿瘤体积[(189.429±17.562)mm3]明显小于空白组[(365.844±20.713)mm3]和pei静脉给药组[(315.507±20.491)mm3]。结果表明,pei能有效介导sirna分子转染进入细胞质并能特异性沉默靶基因的表达。未经组织靶向性修饰的pei不具有肿瘤靶向作用,瘤内注射的抗肿瘤效应优于静脉给药途径,这为进一步研究pei介导的sirna分子体内基因沉默效应的机制和优化该给药系统临床治疗肿瘤应用奠定了基础。