可活化细胞穿膜肽的设计与酶解研究

本文设计可活化细胞穿膜肽(activatablecell-penetratingpeptide,acpp),对合成的acpp进行酶解研究。acpp由3部分连接而成,寡聚阴离子序列肽-基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,mmp)的底物肽-寡聚阳离子序列肽。采用反相高效液相色谱(reversed-phasehighperformanceliquidchromatography,rp-hplc)监测37℃条件下iv型胶原酶(含mmp-2和mmp-9)对acpp的酶解过程。收集酶解成分进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrixassistedlaserdesorptionionizationorthogonaltimeofflightmassspectrometry,maldio-tof-ms)检测,比对推测酶解碎片的序列。结果表明,acpp可被iv型胶原酶裂解,释放出寡聚阳离子序列肽,即细胞穿膜肽(cell-penetratingpeptide,cpp),acpp裂解一半的时间约为4h。酶解发生于目标位点,但不排除acpp裂解后肽段的再次断裂。