建泽泻法呢基焦磷酸合酶分子克隆、分布表达及生物信息学研究

三萜类化合物是道地药材建泽泻中的主要药效成分,在癌症治疗方面有很大的应用潜力。法呢基焦磷酸合酶(fpps)为三萜类化合物合成途径中的重要限速酶之一,本文运用同源克隆和快速cdna末端扩增(race)技术相结合的方法,克隆了建泽泻fpps基因的全长cdna(accessionno.hq724508),fppscdna全长为1531bp,含有1个1032bp的开放阅读框,编码343个氨基酸的蛋白,包含5个保守的功能域,其中两个富含天冬氨酸(ddxxd)。实时荧光定量pcr(qrt-pcr)结果显示建泽泻fpps基因在各器官中均有表达,10月至12月上旬相对表达量呈上升趋势,后下降,其中叶片表达量较高,块茎、根、叶柄表达量相对较低。高效液相(hplc)分析结果表明不同生长期建泽泻主要药效成分23-乙酰泽泻醇b变化趋势与fpps基因表达量变化一致,初步证明fpps是泽泻醇类化合物合成途径中的重要调控位点。本研究为利用植物基因工程改善中药材品质提供科学依据。