重组腺病毒人白细胞介素2的质量分析

目的通过对重组腺病毒人白细胞介素2(adv-il2)的质量研究和实验方法参数的选择,建立adv-il2的质量控制标准。方法选用cpe法测定病毒滴度;将病毒转染hela细胞,表达出il-2,分别用mtt法和elisa法测定il-2的活性和表达量。建立了uv和ie-hplc系统分析纯度;琼脂糖凝胶电泳检查基因组分子量和基因组酶切图谱;pcr法鉴定病毒特征基因e2b区、il-2表达基因盒和外源因子(复制型病毒rcv,hiv,hbv和hcv);按照《中国生物制品规程》的有关规定进行了其他项目检查。结果测定的重组腺病毒人白细胞介素2原液滴度达3×1010pfu·ml-1。il-2表达活性达700u·ml-1,表达量约25ng·ml-1。制品的a260nm/a280nm为1.23;ie-hplc纯度检查大于98%。基因组分子量和基因组酶切图谱以及病毒特征基因e2b区和il-2表达基因检查结果均在理论值范围;复制型病毒rcv,hiv,hbv和hcv检测均呈阴性;其他项目均符合规定。结论建立了重组腺病毒人白细胞介素2的质量标准,并可有效地控制制品的质量。