非洲爪蟾卵无细胞凋亡体系的建立非洲爪蟾卵无细胞凋亡体系的建立

目的建立一种简便、高效的无细胞凋亡体系,探讨外源细胞核在其中的凋亡过程及z-vad-fmk对其的抑制作用。方法超速离心制备非洲爪蟾卵无细胞体系,用细胞色素c激活为凋亡体系。应用荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳、apoalertcaspase-3colorimetricassay等方法检测外源细胞核在无细胞凋亡体系中的凋亡过程及z-vad-fmk的抑制作用。结果制备的爪蟾卵无细胞体系可由细胞色素c激活为凋亡体系,外源加入的细胞核呈现典型的形态学变化，总dna特异降解形成dnaladder。体系内内源特异核酸酶被激活。z-vad-fmk可抑制dnaladder的形成。凋亡特异蛋白酶xcpp32活性明显升高。结论本实验建立的无细胞凋亡体系可以高效的诱导外源细胞核凋亡,重现体内过程。