格列美脲蛋白结合作用的高效液相色谱-迎头分析法

目的研究格列美脲与人血清白蛋白(humanserumalbumin,hsa)结合作用。方法采用高效液相色谱-迎头分析法(highperformanceliquidchromatography-frontalanalysis,hplc-fa)。色谱柱为内表面反相(internal-surfacereversed-phase,isrp)硅胶柱pinkertongffii-s5-80(150mm×4.6mmid,5μm)；流动相为67mmol·l-1磷酸盐等渗缓冲液(ph7.4,i=0.17mol·l-1)；流速0.2ml·min-1；检测波长230nm；进样量900μl；柱温37℃。结果应用非线性回归参数估算求得hsa分子上两类结合位点结合的格列美脲分子数及相应的结合平衡常数：n1=1和k1=5.1(μmol·l-1)-1；n2=7和k2=0.017(μmol·l-1)-1。结论hplc-fa法操作简便，适用于研究格列美脲与hsa的结合作用。