|
药学学报 2006
dna引物酶抑制剂碘化-3,3′-二乙基-9-甲基-硫杂羰花青诱导人白血病hl-60细胞凋亡, PP. 978-984 Abstract: 目的研究dna引物酶抑制剂碘化-3,3′-二乙基-9-甲基-硫杂羰花青(dmtcci)诱导人粒细胞性白血病hl-60细胞凋亡并探索其机制。方法分别采用不同浓度的dmtcci处理培养于rpmi-1640培养基的hl-60细胞。采用mtt法检测dmtcci对hl-60细胞的生长抑制作用。采用流式细胞仪和dna琼脂糖凝胶电泳方法检测细胞凋亡。采用蛋白免疫印迹(westernblotting)法观察凋亡相关蛋白survivin,bcl-xl,bad,bax,bcl-2,caspase-9,caspase-3,caspase-6,parp,dff45和laminb的表达。采用apoalertcaspase-3分析试剂盒检测caspase-3的活性。结果dmtcci具有抑制人白血病hl-60细胞增殖的作用,其ic50值为0.24μmol·l-1。流式细胞仪和dna琼脂糖凝胶电泳结果显示,dmtcci可诱导hl-60细胞凋亡。在经dmtcci处理的hl-60细胞中,survivin和bcl-xl蛋白的表达水平下调,bad和bax蛋白的表达水平上调,bcl-2蛋白的表达水平无变化,caspase-9,caspase-3,caspase-6,parp,dff45和laminb被分别裂解,产生相应裂解产物。在hl-60细胞中,caspase-3的活性在1μmol·l-1dmtcci处理3h时明显升高,在处理12h时达到最高峰。结论dmtcci可抑制人白血病hl-60细胞的增殖并诱导其发生细胞凋亡。bcl-2家族蛋白、survivin和caspases家族蛋白可能参与了上述诱导hl-60细胞凋亡的过程。
|