灯盏花素对谷氨酸诱导大鼠海马神经细胞毒性的保护作用

选用培养的海马神经细胞研究灯盏花素(breviscapine，bre)对谷氨酸(glutamate，glu)诱导神经细胞毒性的保护作用及其机制。新生大鼠海马神经细胞体外培养8d后，用l-谷氨酸(0.1，0.5及1.0mmol·l-1)处理30min；灯盏花素处理组在加入l-谷氨酸的同时给予不同剂量的灯盏花素(10，20及40μmol·l-1)；继续正常培养24h后，用annexinv联合流式细胞仪检测细胞的凋亡和坏死率；rt-pcr分析凋亡蛋白抑制剂xiapmrna的表达。结果表明，l-谷氨酸浓度依赖性地诱导神经细胞发生凋亡和坏死，并使细胞xiapmrna表达发生浓度依赖性的双向变化：0.1mmol·l-1l-谷氨酸使神经细胞xiapmrna表达增强，而较高浓度使xiapmrna表达下调。灯盏花素(20和40μmol·l-1)可有效抑制谷氨酸诱导的神经细胞死亡，分别使细胞凋亡率下降30.4%和40.1%，坏死率下降32.5%和38.8%；并上调xiapmrna表达45.1%和54.9%。激光共聚焦显微技术联合fluo-3荧光标记检测表明，l-谷氨酸处理过程中海马神经细胞内ca2+水平显著升高，而灯盏花素可抑制谷氨酸引起的细胞内ca2+超载(p<0.01)。以上结果提示，灯盏花素可能通过抑制细胞ca2+超载，调节凋亡抑制因子xiap的表达而有效保护谷氨酸对神经细胞的兴奋性毒性作用。