sars冠状病毒未知功能小蛋白大肠杆菌表达及条件优化

将人工合成的sars-cov三个未知功能小蛋白x4、x5和orf10的编码基因克隆到载体pet32a中，构建其表达载体。再将这些表达载体转入大肠杆菌中进行表达，sds-page和westernblotting结果证明，x4、x5和orf10三个基因在大肠杆菌中均获得表达。分别研究了温度、iptg浓度、iptg加入时间和诱导时间对重组蛋白表达的影响。通过正交分析，得到了上述三种重组蛋白的优化表达条件。根据最佳条件表达重组蛋白，获得重组蛋白占总蛋白的百分比分别是：x4，20%；x5，27.8%；orf10，68.5%。