重组金葡菌肠毒素o的克隆表达及生物学活性分析

克隆金葡菌肠毒素o(seo)的全长基因，实现其可溶性表达,并对纯化的表达产物进行生物学活性分析。从金葡菌fri100菌株基因组中得到seo基因，克隆至谷胱甘肽s-转移酶(gst)融合表达载体pgex-4t-1，转化大肠杆菌，获高效表达。融合蛋白gst-seo经glutathionesepharose4b亲和纯化和凝血酶消化获重组seo(rseo)后，mtt法检测脾淋巴细胞的增殖作用，分析纯化后rseo的生物学活性。测序结果表明，得到正确的肠毒素seo基因序列，并获高效表达的融合蛋白；mtt结果表明，rseo具有与sec相当的显著的促淋巴细胞增殖以及抑制肿瘤细胞生长的能力。本研究成功克隆、表达、纯化了具有抗肿瘤生物学活性的rseo蛋白，为进一步研究该蛋白的抗肿瘤机制奠定了基础，并有望成为一种新的超抗原制剂用于肿瘤的临床治疗。