重组新城疫病毒rclone30-cd/5-fc系统的抗肿瘤活性

本研究提取大肠杆菌jm109菌株的全基因组,克隆获得cd基因,将cd基因和ires-egfp基因构建到pee12.4表达载体上,形成pee12.4ie-cd真核表达载体。用该表达载体转染人肝癌细胞后,以不同浓度的5-氟胞嘧啶(5-flucytosine,5-fc)处理细胞,采用噻唑蓝(mtt)法测定cd/5-fc系统对人肝癌细胞hepg2的杀伤效果。当前导药物5-fc的浓度分别为10、20和30mmol·l？1时,cd/5-fc系统对hepg2细胞的杀伤效率分别为18.07%、42.98%和62.20%,与对照组相比较差异具有统计学意义。急性毒性实验结果表明,小鼠尾静脉注射不同剂量5-fc,组间剂量比为1∶0.5,采用改良寇氏法测定5-fc对小鼠的ld50为507mg·kg？1,95%可信限为374～695mg·kg？1。再以ld50实验中最大ld0剂量为基准,组间剂量差值为10mg·kg？1,测得最大安全剂量为200mg·kg？1,并对体重、体征指标进行跟踪观察。这些检测结果可为动物实验奠定基础。将cd基因连于新城疫病毒(ndv)rclone30载体中并建立肿瘤动物模型,抑制肿瘤实验结果表明,重组新城疫病毒rclone30-cd/5-fc系统具有较高的体内抗肿瘤活性。综上所述,克隆获得的cd基因具有生物学活性,重组rclone30-cd/5-fc系统是一种潜在的治疗肿瘤的方法。