灵芝三萜合成关键元件glcyp450及其还原酶glnadph的基因克隆及共表达载体构建

细胞色素p450是灵芝三萜生物合成途径中的关键元件,其催化反应过程中需要有nadph/nadh为其传递电子。本课题组根据已获得的赤芝(ganodermalucidum(leyss.exfr.)karst.)基因组数据中的cyp450和nadph转录本序列,利用rt-pcr方法获得灵芝cyp450(glcyp450)和nadph(glnadph)基因的全长cdna序列,并在序列两端引入相应的限制性内切酶位点,通过酶切及连接反应,将glcyp450和glnadph重组到酵母表达载体pesc-ura中,成功构建了酵母表达载体质粒pesc-glnadph-glcyp450,为通过合成生物学手段研究灵芝三萜生物合成奠定基础。