连翘败毒丸中原料药材的分子鉴别

为研究分子标记技术在成药鉴定方面的应用,本文选用连翘败毒丸为研究对象,采用改良ctab法提取其总dna,通过聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,pcr)分别对psba-trnh和rbcl两个叶绿体序列进行梯度扩增,将扩增产物与peasytm-t5vector连接后,转化到大肠杆菌trans1-t1感受态细胞中,挑取单克隆,并选择阳性克隆进行测序。所得序列校正、比对后,进行blastn比对分析,同时采用mega4.0软件构建系统聚类树。结果表明,通过psba-trnh序列分析可以鉴定出9种原料药材,rbcl序列分析可以鉴定出6种原料药材。本研究结果说明采用分子标记技术鉴定中成药原料具有一定的可行性。