红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化的机制研究

探讨细胞外信号调节激酶(extracellularsignal-regulatedkinase,erk1/2)和pi3k/akt/mtor信号通路介导红景天苷诱导骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells,bmscs)向神经细胞定向分化中的作用。以小鼠bmscs细胞系(d1细胞)为研究对象,实验分为对照组和红景天苷诱导组。红景天苷(5、25、50、100和200μg·ml？1)作用于细胞24h和红景天苷(100μg·ml？1)作用细胞0.5、1、3、6、9、12、24、48和72h。采用细胞免疫荧光染色方法、实时定量pcr(real-timepcr)和westernblotting技术分别检测细胞nse、map2、β-tubuliniii、nes和gfap的阳性率和β-tubuliniii、nse、erk1/2和akt的表达;pd98059和ly294002分别阻断erk1/2和pi3k/akt/mtor信号通路后,检测erk1/2和nse的表达。结果表明,随着红景天苷诱导时间的延长,nse、map2、nes、β-tubuliniii和gfap的阳性率明显增加,nse和β-tubuliniii蛋白的表达显著上调(p<0.01)。随着红景天苷水平和作用时间的增加,erk1/2、aktmrna和蛋白的表达明显上调;pd98059和ly294002分别阻断ekr1/2和pi3k/akt/mtor信号通路后,显著抑制红景天苷促进nse、nes和β-tubuliniiimrna和nse蛋白表达。结果提示,红景天苷通过激活erk1/2和pi3k/akt/mtor信号通路,促进bmscs向神经细胞定向分化。