反义fak寡核苷酸抑制fak-erk1/2介导的平滑肌细胞迁移和粘附

目的研究fak-erk1/2信号通路在平滑肌细胞迁移和粘附中的作用及fak反义寡核苷酸对其的调控作用。方法通过纤粘连蛋白(fibronectin,fn)诱导平滑肌细胞迁移和粘附,以免疫沉淀和westernblot方法检测粘着斑激酶(focaladhesionkinase,fak)和细胞外调控激酶1/2(extracellularregulationkinase,erk1/2)及其磷酸化的表达量。将fak反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotides,odns)经脂质体转染细胞,观察转染后反义odn对fak和erk磷酸化、细胞粘附和迁移的影响。结果fn在有效诱导平滑肌细胞迁移和粘附时fak和erk1/2也呈明显表达,fn20μg·ml-1可使磷酸化处于较高表达量。脂质体可有效地介导odns转染。转染后fak及erk1/2磷酸化表达量明显减少。结论由活化的fak和erk1/2介导的信号转导促进了细胞外基质诱导的smcs迁移和增殖,反义fakodns可有效地对此进行抑制。