青鱼病原嗜水气单胞菌分离鉴定、毒力因子检测及药敏试验

？2011年8月江苏常州市武进区前黄镇某养殖场养殖的青鱼出现大量死亡，症状主要表现为病鱼口腔、头部、眼眶、鳃盖边缘、鳍条基部及鱼体尾柄处充血，肛门红肿。解剖后，可见肠道内无食物，并充血发红，腹腔内有的有淡黄色积液，肝胰脏呈紫红色、胆囊肿大。从患病青鱼肝脏、血液中分离到大量优势生长的细菌。人工感染试验证实分离菌(wj110801-1)对健康青鱼具有很强的致病性。对分离菌进行了形态特征、理化特性等表型生物学特征检验、毒力因子检测、胞外酶分析及药敏试验，同时应用分子生物学方法测定了代表菌株的16srrna基因序列。结果显示，病原菌进化树与嗜水气单胞菌同源性最高，在99%以上；结合分离菌的表型及分子生物学分析，判定该菌为气单胞菌属(aeromonas)的嗜水气单胞菌(a.hydrophila)。气溶素aer和不耐热性细胞肠毒素alt是嗜水气单胞菌主要的毒力相关因子，利用设计的两对特异性引物对进行aer和alt基因的pcr扩增，分离菌可以扩增出大小分别为280bp的和250bp的基因片段，表明本次分离的病原嗜水气单胞菌具有气溶素和细胞肠毒素毒力因子；胞外酶分析显示，分离菌具有淀粉酶、dna酶、脲酶、明胶酶活性。分离菌进行药敏试验结果表明，供试37种抗生素中，氨曲南、氟苯尼考、庆大霉素等12种抗生素抑菌效果显著。文章报道了病原嗜水气单胞菌引起常州青鱼大量死亡，并针对病原做了详细的研究，对青鱼的疾病防控和健康养殖具有重要的参考意义。