赤红壤地区森林土壤球囊霉素相关蛋白测定方法

？球囊霉素是丛枝菌根真菌菌丝产生的一种糖蛋白，被证明具有改善土壤结构、固定土壤中重金属、保护有机碳等重要的生态功能。球囊霉素目前尚无法纯化，一般通过测定球囊霉素相关蛋白（grsp）来对其定量。由于grsp测定方法的非专一性，目前尚无适宜于各种陆地生态系统的标准测定方法。本文针对grsp测定结果可能受到提取时间、离心力以及测定前再次离心时离心力的大小等因素的影响，设置对比试验，对亚热带赤红壤地区土壤grsp提取测定，以期获取适合于该地区的grsp测定方法。结果表明：当提取时离心时间为10min，10000×g的离心力提取的易提取grsp（ee-grsp）是5000×g提取的1.15～1.82倍，但离心力大小对总grsp（t-grsp）影响不显著；当提取时离心力为5000×g时，离心时间由10min延长至15min能够显著提高ee-grsp含量；测定之前对上清液再次离心，若使用较大的离心力（≥10000×g），将显著影响grsp测定值；经过6次连续提取，能够提取t-grsp理论最大含量的97.7%～99.8%；因此，在亚热带酸性赤红壤森林生态系统中，grsp的提取建议采用10000×g10min的离心力和离心时间组合，测定前对上清液再次离心时，应以≥10000×g的离心力为宜，研究结果为该地区grsp的标准化测定提供了理论依据。