拟南芥ssr检测体系的优化

？以拟南芥(arabidopsisthaliana)幼苗为实验材料，采用单因素筛选法及l16(45)正交实验方法，对简单序列重复(ssr)技术中聚合酶链式反应(pcr)组分、扩增程序、电泳检测等环节进行优化。优化25μl反应体系为:1×pcrbuffer、20ng模板dna、1.5mmol·l-1mg2+、0.3μmol·l-1引物、150μmol·l-1dntps和1.0？utaqdna聚合酶。扩增程序为:94℃预变性5min，94℃变性30s，57℃退火30s，72℃延伸45s，共30个循环，72℃延伸10min。用非变性聚丙烯酰胺凝胶(eb染色)电泳检测并取得较好效果。利用该体系进行扩增，所得谱带清晰、稳定、非特异性带少。