采用pcr-rflp技术在不同水平上鉴定大豆根瘤菌

？采用16srrna基因pcr扩增与限制性酶切片段多态性分析(rflp)技术对选自弗氏中华根瘤菌(s.fredii)、大豆慢生根瘤菌(b.japonicum)和埃氏慢生根瘤菌(b.elkanii)的19株代表菌进行了比较分析，根据用3种限制性内切酶的rflp分析结果，可将供试菌株分为s.fredii,b.japonicum,b.elkaniiⅱ和b.elkaniiⅱa等4种基因型。各类菌株之间没有交叉，因此本研究采用的pcr-rflp技术不失为一种快速鉴别大豆根瘤菌的新方法。采用本技术已将分离自中国的22株快生菌和19株慢生菌分别鉴定为s.fredii和b.japonicum。对供试参比菌株和野生型菌株进行的16s～23s基因间隔dna(igs)的pcr-rflp分析结果表明：s.fredii和b.japonicum菌株的igs长度不同，所有供试s.fredii菌株的igs为2.1kb,而供试b.japonicum菌株则为2.0kb。依据rflp的差异，可将来自中国两个不同地区的s.fredii株区分为2个基因型，而来自中国东北黑龙江地区的19株b.japonicum菌株则可分为11个基因型。对上述野生型菌株还进行了rep-pcr和eric-pcr分析并确定其具有菌株水平的特异性。