大白菜brwrky33基因上游调控序列的克隆及其功能研究

？摘要根据大白菜est和基因组序列，利用pcr技术从大白菜品种龙白二号(brassicarapasubp.pekinensiscv.longbaiⅱ)基因组中克隆转录因子基因brwrky33起始密码子上游大小1755bp的调控序列。然后，构建5'端缺失突变体，与gus基因融合，构建植物表达载体。将载体转化拟南芥(arabidopsisthaliana)哥伦比亚生态型(columbiaecotype)，进行植物组织gus化学染色分析。结果表明，brwrky33密码子上游－1755~－315区域存在的多个w-box元件可能与该基因表达的负调控相关，－315bp区域含有brwrky33基因转录必需的基本元件。对接种软腐欧文氏菌(erwiniacarotovorasubsp.carotovora)后不同时期的植株进行染色，发现该病原菌侵染使转基因植株gus基因表达量增加，表明brwrky33基因在植物对软腐病抗性反应中具有一定的作用。