环介导等温扩增技术快速诊断猪肺炎支原体

？摘要利用环介导等温扩增(loop-mediatedisothermalamplification,lamp)方法建立了猪肺炎支原体(mycoplasmahyopneumoinae)的快速检测方法。该方法以猪肺炎支原体保守性基因16srrna为靶序列设计了6条特异引物，在63℃等温条件下，30min即可完成反应。结果显示,lamp技术优于pcr技术。在敏感性实验中，lamp方法的能检测出10个包含靶基因片段的重组质粒，敏感性高于pcr方法10倍；特异性实验中，lamp方法和pcr方法均显示出了高度的特异性；在对127个临床鼻拭子样本的检测中，lamp方法检测结果是所有样本都为阳性，而pcr检测出了116份阳性。证明本研究所建立的方法，对临床样本的检测的敏感度高于常规的pcr法。lamp方法具有操作简便、快速、高效、敏感、特异、经济的特点，在研究机构以及基层实验室、现场监测的广泛使用具有一定的潜力。