抗苯巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及cielisa试剂盒的研制

？用bsa-papb免疫balb/c小鼠，用细胞融合技术制备并用间接elisa和阻断elisa筛选抗苯巴比妥单克隆抗体(pbmab)杂交瘤细胞株，体内诱生腹水法生产pbmab，应用pbmab研制pb残留竞争elisa(cielisa)快速检测试剂盒(pb-kit)，并测定其性能。结果表明，筛选出3株杂交瘤细胞，最好的3f6-c4株的pbmab间接elisa效价为1∶6.4×105，亲和常数(ka)为1.96×1010l/mol，半数抑制浓度(ic50)为5.7μg/l，与巴比妥的交叉反应率(cr%)12.4%，与其它化合物无cr；pb-kit的线性检测范围1.0～81μg/l，灵敏度0.75μg/l，检测限1μg/l；饲料样和猪尿样的平均添加回收率85.8%和91.3%，平均批内和批间变异系数均<15%。pb-kit具有快速、敏感、特异、简便等特点，适合pb残留快速检测的推广应用。