黑曲霉木聚糖酶基因xynb在大肠杆菌中的表达及重组木聚糖酶的特性

？从黑曲霉(aspergillusniger)mafic-005中克隆得到木聚糖酶基因xynb。序列分析表明，该基因全长745bp，含有一个67bp内含子，编码225个氨基酸，理论分子量为24kd(genbank登录号:dq174549)，与已知黑曲霉xynb基因的同源性均较高。将该基因定向插入大肠杆菌(escherichiacoli)表达载体pet-28a(+)上，并转化e.colibl21获得重组菌株。经过iptg诱导，xynb基因获得特异性表达。经sds-page分析，重组蛋白分子量约为30kd。该重组蛋白经镍nta琼脂糖凝胶ff纯化后达到电泳纯。酶学性质分析表明，重组木聚糖酶最适温度为40℃，最适ph值为5.0，在酸性和常温条件下具有良好的稳定性。