？烟草dreb-like转录因子的克隆与鉴定

？在ncbi网站blast得到5个烟草表达序列标签(est)，据此设计引物，从烟草(nicotianabenthamiana)品种本塞母氏中分离出2条dreb(dehydration-responsiveelementbindingprotein)-like转录因子基因，分别命名为nbdreb1和nbdreb2。与相关ap2/erebp类转录因子比对结果显示，nbdreb1和nbdreb2都具有典型的ap2/erebp转录因子家族erebp亚族a类ap2区特征，并且都能在大肠杆菌(escherichiacoli)中表达。酵母单杂交结果显示，都不具有激活功能。连接pgadt7反式激活载体进行酵母单杂交结果显示：nbdreb1能与dre顺式作用元件结合，nbdreb2则不能，表明nbdreb1为抑制型dreb类转录因子。比较nbdreb1和nbdreb2的ap2区发现：两者在第2位和第49位氨基酸处不同，nbdreb1为y和k，nbdreb2为n和r。