双色荧光pcr检测醉马草内生真菌(neotyphodiumgansuense)

？醉马草内生真菌(neotyphodiumgansuense)曾对我国的畜牧业造成过巨大损失，目前其鉴定仍是基于表型和分离培养的检测技术。本研究以与n.gansuense形态非常相似的同属种n.coenophialum、n.lolii、n.huerfanum、n.chisosum和n.aotearoae等共6种7个标准菌株，以及采自新疆的醉马草种子为环境材料，扩增和测定了它们的β-tub基因约430bp的序列。根据序列分析结果，设计了neotyphodium属的通用taqman探针和引物以及n.gansuense的特异探针和引物，基于双色荧光pcr技术成功建立了快速、敏感的分子检测方法。所建立的检测技术可实现对n.gansuense菌丝培养物、单粒醉马草种子中n.gansuense的检测，并且检测时间只需7h。该检测技术能很好弥补传统检测鉴定方法的不足，可直接应用于国内外畜牧业种子和草坪草种子中n.gansuense带菌率的检测。