小反刍兽疫n蛋白单克隆抗体的制备及竞争elisa方法的建立

？小反刍兽疫(ppr)是由小反刍兽疫病毒(pprv)引起的一种危害严重的急性接触性传染病。为了检测血清中存在的抗pprv的抗体，本研究利用纯化后的真核表达的pprvn蛋白重组蛋白(rbacmid-pprn)作为免疫原免疫balb/c小鼠(musmusculus)，并使用原核表达的pprvn蛋白重组蛋白(rpet-pprn)作为间接elisa检测抗原，共筛选得到8株抗pprvn蛋白的单克隆抗体(mab)。其中1d5单抗腹水效价达1∶106，分泌单抗亚类为igg2b。以1d5作为竞争抗体、纯化后的rpet-pprn蛋白作为包被抗原，建立了检测小反刍兽疫血清抗体的单抗竞争性elisa(c-elisa)方法。所建立的c-elisa方法能够特异性的区分牛瘟阳性血清和小反刍兽疫阳性血清，并具有较高的灵敏度和特异性。应用建立c-elisa检测方法检测共129份山羊(caprahircus)血清样品，与标准c-elisa试剂盒的符合率为96.9%。本研究成功地建立了可特异性检测动物血清中抗pprv抗体的竞争性elisa方法，对小反刍兽疫的诊断、疫苗免疫水平的监控及控制其流行具有重要意义。