基于质粒表达的sirna对猪圆环病毒2型(pcv2)复制的抑制作用

？猪圆环病毒2型(pcv2)是猪圆环病毒相关疾病(pcvad)的必要病原，对养猪生产构成了严重威胁，但当前缺乏有效的防治手段。为了探索治疗pcvad的新途径，分别针对pcv2的病毒复制相关蛋白基因(rep)与衣壳蛋白基因(cap)，构建了pcv2特异的sirna表达质粒(pgensil-r259、pgensil-c297和pgensil-c490)和pcv2非特异的阴性对照质粒(pgensil-scr)。在脂质体介导下，将构建的sirna表达质粒与阴性对照质粒转染pk-15细胞，转染质粒20h后感染pcv2。结果质粒表达的特异sirna抑制了pcv2dna的合成及rep和cap蛋白的表达，使病毒滴度(tcid50)显著下降；针对靶基因不同位点的sirna的抑制效果不同，病毒感染后36h内，sirna对pcv2的抑制作用最强，随后有所下降，但直至感染后60h仍然能够显著抑制pcv2复制。实验结果提示质粒表达的特异sirna能够显著地抑制pcv2的增殖，但这种抑制功能与作用时间呈负相关。