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农业生物技术学报 2011
小麦1b/1r易位系中有活性的ω黑麦碱基因的启动子的克隆与功能验证, PP. 427-433 Keywords: 小麦,1b/1r易位系,ω-黑麦碱,启动子克隆,功能验证 Abstract: ?小麦1b/1r易位系由于具有高产和适应性广等优点,在我国的小麦生产中得到了广泛的应用,但这类品种有一个共同的缺点,就是加工品质比较差,ω-黑麦碱被认为是影响其加工品质的一个重要因素。通过rna干扰途径沉默ω-黑麦碱基因的表达,是改良小麦1b/1r易位系加工品质的一个重要策略。使用由ω-黑麦碱基因自身启动子驱动的rna干扰表达载体,可使转入的基因在需要的部位和需要的时间表达,提高分子育种的效果。为获得有活性的ω黑麦碱基因的启动子,本研究设计了覆盖启动子区和部分编码区的一对特异引物,以小麦(triticumaestivum)1b/1r易位系兰考906为试材,通过pcr克隆得到了与3个有转录活性的ω-黑麦碱基因有对应关系的5个启动子a9-1、h2-1、h7-1、c11和f11-1,选择与其中2个有转录活性的ω-黑麦碱基因分别有对应关系的启动子a9-1和f11-1构建以gus为标记基因的表达载体,并用基因枪对小麦幼嫩种子进行了轰击,通过对gus基因的瞬时表达分析,证实其中一个启动子f11-1具有活性。研究结果为构建由ω黑麦碱基因自身启动子驱动的rna干扰表达载体提供了基础资料。
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