用冻干精子生产icsi小鼠

？前期研究中，我们采用小鼠卵母细胞胞浆内精子注射（icsi）技术，成功地用新鲜精子获得了生理健康的icsi小鼠。在此基础上，本文结合细胞冻干技术，进行了冻干精子icsi生产试管小鼠的尝试。b6d2f1成年公鼠的精子在tris-hcl-edta（ph8.2）溶液中冻干4h后解冻，将其精子头注入到km小鼠成熟卵母细胞的胞质中。6h后，83.0%的卵子受精。用czb溶液体外培养发现，冻干精子生产的胚胎，体外发育至2-c(92.0%vs99.5%)、4-c（52.7%vs97.2%）、桑椹胚（36.6%vs86.3%）和囊胚的比例（21.4%vs68.7%）极显著地（p<0.01）低于新鲜精子生产的icsi胚胎。移植2-c期冻干精子icsi胚胎检测体内发育，结果发现，d10的着床率为63.0%（17/27）；胎鼠的出生比例为21.7%（13/60），这些icsi小鼠成年后的生理和生殖能力正常。试验结果说明，精子冻干后，仍能生产icsi动物，冻干技术可以用于哺乳动物精子的保存。