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农业生物技术学报 2014
蛹虫草不同水提物体外抗白血病活性研究, PP. 793-804 Keywords: 蛹虫草,水提物,白血病细胞,抗肿瘤活性,细胞凋亡 Abstract: ?蛹虫草(cordycepsmilitaris)是一种著名的药用菌,在东亚地区已被广泛用作中药材和滋补品,对多种肿瘤细胞有治疗作用。本研究探讨了蛹虫草液体培养的菌丝体(cmme)、发酵液(cmbe)和全发酵产物(菌丝体和发酵液,cmpe)的水提物对人(homosapiens)白血病细胞jurkat和k562的作用。四甲基偶氮唑蓝(methylthiazoletetrazolium,mtt)分析结果表明,这3种水提物对两种白血病细胞均有显著的抑制作用,在处理24h时已经比较明显,且呈剂量和时间依赖性。与cmbe相比,cmme和cmpe对人白血病细胞的抑制效果更为显著,但两者的差异则不显著。这3种水提物对两种细胞的半数抑制浓度(ic50值)分别为cmme<cmpe<cmbe。annexinv-fitc/pi双标记流式细胞术检测结果表明,cmme和cmpe的抑制效应与细胞凋亡有关,且早期和晚期的jurkat和k562细胞凋亡率与水提物浓度呈正比。同时,cmme和cmpe对jurkat细胞的凋亡诱导效果相似,但前者能引起更多的k562细胞凋亡。整体上,3种水提物中以cmme对细胞的抑制效应和细胞凋亡作用较为明显。另外,通过westernblot法检测抗凋亡因子bcl-xl(b-celllymphoma-extralarge)的表达水平发现,处理48h后,4.00mg/ml的cmme能显著抑制jurkat细胞中bcl-xl蛋白的表达,而在高浓度cmme(8.00mg/ml)的长时间处理(60h)下,k562细胞中bcl-xl蛋白的表达量略有下降。以上数据表明,蛹虫草水提物的抗肿瘤活性与细胞凋亡有关,且cmme在白血病治疗中比cmbe和cmpe更具有应用潜力。本研究首次比较了蛹虫草全发酵产物、发酵液和发酵菌丝体水提物对肿瘤细胞生长的抑制作用,蛹虫草3种水提物抗白血病活性的研究结果表明,其活性物质的产生主要为菌丝体内,而非分泌到细胞外。本研究结果为蛹虫草用于白血病治疗及其他相关研究提供基础数据,并为下一步探索其机理提供一定的参考资料。
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