鸡γ-干扰素基因的瞬时表达及其抗病毒活性检测

？采用pcr技术从质粒pet-chifn-γ中扩增得到ifn-γ基因，将其亚克隆到真核表达载体pcaggs中。将鉴定正确的克隆命名为pcaggs-chifn-γ，体外转染cef细胞，24小时后经间接免疫荧光（ifa）和免疫印迹（western-blot）检测，表达蛋白具有良好的免疫原性。然后利用表达绿色荧光蛋白（gfp）的重组水疱口炎病毒（vsv*gfp）在cef细胞上检测表达的chifn-γ抗病毒活性（ava），经检测其抗病毒活性为2×103au/ml，并且其活性可被抗鸡ifn-γ的多克隆抗体阻断。结果表明：chifn-γ在鸡胚成纤维(cef)细胞中成功表达，并且表达的chifn-γ具有良好的抗病毒活性。