|
农业生物技术学报 2009
猪胸膜肺炎放线杆菌环介导等温扩增检测方法的建立与应用Keywords: lamp,胸膜肺炎放线杆菌,pcr,检测 Abstract: ?本文建立了敏感、特异的胸膜肺炎放线杆菌环介导等温扩增检测方法。以1型胸膜肺炎放线杆菌apxiv基因片段为靶序列设计了一组引物,并建立了lamp反应体系,在63℃等温条件下反应45min,最低能检测到102个拷贝的目的基因,敏感性是pcr方法的10倍。通过对1~10型胸膜肺炎放线杆菌、多杀巴氏杆菌、链球菌、支原体等18种病原微生物的检测,证明该法具有很强的种特异性。另外,通过对8头实验感染猪和127份临床发病猪的鼻拭子的检测发现,该法对鼻拭子中胸膜肺炎放线杆菌的检出率为100%,优于pcr方法。
|