黑籽南瓜基因组可转化人工染色体(tac)文库的构建及分析

？黑籽南瓜(cucurbitaficifolia)具有很强的抗逆能力，对低温、干旱、贫瘠土壤以及瓜类枯萎病等逆境均具有较强的抗性，这些优良的抗性基因很难通过有性杂交转移到其它瓜类作物上，但可通过可转化人工染色体(tac)以大片段的形式转化到其它瓜类作物中。本研究利用tac载体构建了黑籽南瓜基因组dna文库，该文库包含57560个克隆，保存在150块384孔板中，其库容量相当于黑籽南瓜基因组的7倍。tac文库克隆插入片段大小分布范围为20~100kb，超过40kb插入片段克隆占40%以上，插入片段平均大小为45kb。在挑取的15个tac克隆中无空克隆；细菌继代培养30、60和100代后质粒的酶切鉴定表明，tac克隆可以在大肠杆菌(escherichiacoli)dh10b中稳定复制和保存，说明本研究构建的文库质量较高。该研究结果表明，tac文库为黑籽南瓜抗性基因的克隆、功能验证、物理图谱的构建和基因组测序等有关研究提供了基础资料。