荷那龙罗非鱼两种胰岛素样生长因子基因(igf-ⅰ和igf-ⅱ)的克隆、序列分析及组织表达特征

？胰岛素样生长因子(insulin-likegrowthfactors,igfs)在鱼类的生长、发育过程中起重要作用。本研究克隆了荷那龙罗非鱼(oreochromishornorum)两种胰岛素样生长因子(igf)基因，并采用半定量rt-pcr方法检测了两种基因在不同组织中的表达情况。以荷那龙罗非鱼肝脏总rna为模板，rt-pcr结合3'race与5'race法扩增igf-ⅰ与igf-ⅱ的cdna。扩增片段插入pmd-t载体并测序。序列分析表明：igf-ⅰ总长1305bp；igf-ⅱ总长1091bp。其推测氨基酸序列都具有胰岛素样生长因子基因的典型特征结构，分别包括信号肽和b、c、a、d、e5个区域，并具有6个保守的半胱氨酸，但它们之间推测氨基酸全序列的同源性较低，为26%。正常生理条件下，两种igf在所有被检测组织中均有表达。igf-ⅰ在肝脏、肌肉和性腺中表达量较高，在肾脏中表达量最低；igf-ⅱ在肾、胃、肠、脾、垂体中表达量较高，在肌肉中表达量最低。在所有被检测组织中，igf-ⅱ的表达量均高于igf-ⅰ的表达量，但二者的表达量只有在肠、脾、胃、肾和垂体中具有显著性差异(p<0.05)。雌雄个体中除脾、胃、肾、垂体外，igf-ⅰ在雌性中的其它组织表达均低于雄性，其中雄性个体中肌肉组织igf-ⅰ的表达水平显著高于雌性个体(p<0.05)；igf-ⅱ在雌雄个体相同组织间的表达水平比较差