小麦条锈菌实时荧光定量pcr分析中内参基因的选择

？选择合适的内参基因是利用实时荧光定量pcr准确分析基因相对表达量的先决条件。基于现有对内参基因的研究，本研究挑选出10个基因作为小麦条锈菌(pucciniastriiformisf.sp.tritici)的候选内参基因。经过pcr扩增效率筛选，8个基因符合要求可用于稳定度的筛选，这些基因包括泛素连接酶(ubc)、泛素连接酶e2(ubce2)、核糖体蛋白s5(rps5)、α微管蛋白(tuba)、β肌动蛋白(actb)、β微管蛋白(tubb)、延伸因子1(ef1)和延伸因子3(ef3)。本研究以两种小麦条锈菌(cyr32和pst78)的夏孢子、萌发芽管分别接种两个小麦(triticumaestivam)品种(cyr32/xz9104和pst78/avs)后0.5、3和14d的样品为材料，利用实时荧光定量pcr技术，检测了这8个持家基因在不同发育阶段的小麦条锈菌中的表达情况。经genorm软件分析发现，3个持家基因在样品中的表达趋势与小麦条锈菌的侵染过程相符合。actb、tubb和tuba的组合可作为检测小麦条锈菌基因表达的内参基因。