奶山羊过氧化物酶体增殖物激活受体基因(pparγ)的克隆、表达及功能初步分析

？过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisomeproliferatoractivatedreceptorγ,pparγ)在脂肪和糖代谢平衡中起重要作用。为研究奶山羊(caprahircus)pparγ基因在泌乳过程中的生理功能，本研究以西农萨能奶山羊乳腺组织为材料，利用rt-pcr和race技术，克隆奶山羊pparγ基因cdna全长；利用荧光定量pcr检测该基因在奶山羊10个组织以及不同泌乳时期乳腺组织中的表达量；利用pparγ特异性激动剂罗格列酮(rosiglitazone,rosi)处理乳腺上皮细胞后，荧光定量pcr检测细胞内脂肪酸代谢相关基因的表达量。结果表明，奶山羊pparγ基因cdna序列全长为1751bp(genbank登录号为:hq589347)；同源性分析发现，pparγ基因在哺乳动物间有较强的保守性；结构预测表明，奶山羊pparγ蛋白具有2个锌指结构以及配体结合域；组织表达谱分析显示，pparγ基因在奶山羊的脂肪组织中表达量最高，其次是瘤胃，而肌肉组织表达量最少；奶山羊两个泌乳时期乳腺组织中pparγ表达量分析表明，泌乳盛期的表达量约是干乳期的2倍。罗格列酮处理乳腺上皮后检测发现，细胞内脂肪酸代谢相关基因：脂蛋白酯酶(lipoproteinlipase,lpl)、脂肪酸结合蛋白(fattyacidbindingprotein,fabp3)、脂肪分化相关蛋白(adiposedifferentiationrelatedprotein,adrp)和47kd尾部相互作用蛋白(47-kdtailinteractingprotein,tip47)等表达量显著性上调。研究结果提示，pparγ基因在奶山羊泌乳过程的脂肪酸代谢中可能其重要作用，为进一步研究奶山羊个体水平调控乳脂生成、改善乳脂品质和发挥乳腺生物反应器功能提供基础资料。