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农业生物技术学报 2013
紫外(uv-b)及超声波处理对雷公藤悬浮细胞中三种次生代谢物含量的影响, PP. 1009-1018 Keywords: 雷公藤,悬浮细胞培养,紫外辐照,超声波处理,次生代谢物 Abstract: ?目前已经找到一种由雷公藤(tripterygiumwilfordiihook.f.)细胞培养法生产雷公藤甲素和生物碱的方法,但是这种方法生产的次生代谢物产量较低,因此本研究利用紫外光(uv-b)辐照和超声波处理对雷公藤悬浮培养体系中萜类次生代谢物的含量进行了检测分析。在雷公藤悬浮细胞的不同培养时期,利用不同时长的uv-b辐照和超声波分别处理的雷公藤悬浮细胞和培养体系,采用高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,hplc)对悬浮细胞和培养液中雷公藤内酯醇、吉碱和次碱的含量进行测定。结果表明,利用uv-b辐照和超声波处理均可以显著提高雷公藤悬浮培养体系中悬浮细胞生长量及其次生代谢物的含量。紫外辐照及超声波处理均可使雷公藤悬浮细胞的生长量比对照提高1~2倍。在雷公藤悬浮细胞生长周期的第13天用uv-b辐照90min,雷公藤悬浮细胞中内酯醇、吉碱和次碱产物含量达到最大,分别为5.185、39.747和42.189μg/l;超声波处理40s时,次生代谢物含量达到最大,分别为5.185、40.080和45.472μg/l,与对照相比提高1~3倍。另外超声波处理对雷公藤悬浮细胞中次生代谢物释放分泌入细胞培养液中有一定程度的促进作用,通过对雷公藤悬浮细胞培养液中次生代谢物含量的检测发现,在处理时长分别为40s时,内酯醇、吉碱和次碱的转化率分别达到93.7%、86.6%和88.1%,与对照相比含量提高1~3倍。本研究为解决雷公藤野生资源短缺,利用雷公藤悬浮细胞培养生产雷公藤内酯醇、吉碱和次碱提供基础资料。
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