矮牵牛3个赤霉素2-氧化酶基因的克隆及初步功能分析

？赤霉素(ga)是一类重要的植物内源性激素，在植物生长和发育过程中发挥重要的作用,其调控作用也极大地影响观赏植物的观赏性。矮牵牛(petuniahybridavilm)是进行比较基因组学研究的优良材料，同时也是一个模式观赏植物。目前，在拟南芥(arabidopsisthaliana)和水稻(oryzasativa)中，大多数与赤霉素生物合成和降解相关的基因已经被克隆和研究，但在矮牵牛中鲜有相关的研究报道。本实验利用race技术从矮牵牛中获得了3个赤霉素2-氧化酶的全长cdna序列，分别命名为phga2ox1~3(登录号：gu059939、jq323102和jq323101)。系统发生分析显示这3个基因都属于c19ga2氧化酶分支，与番茄(solanumlycopersicum)的slga2ox2，4和5，烟草(nicotianatabacum)的ntga2ox1~3最为接近。荧光定量pcr分析表明，phga2ox1~3的表达谱相似，均在茎、叶、开花第一天的雄蕊和雌蕊、开始萎焉的花瓣中有较高的表达，在萼片、开花第一天的花瓣、授粉后7d的果实中表达量极低。不过，phga2ox3mrna的丰度较phga2ox1和2的低很多，当使用相同的模板和扩增效率相似的引物时，其ct值较phga2ox1和2的分别低4~5个循环(ctphga2ox1~26，ctphga2ox2~25，ctphga2ox3~30)。利用根癌农杆菌(agrobacteriumtumefaciens)介导法获得2×35s：：phga2ox1转基因矮牵牛植株表现出节间长度明显变短、叶色变深等缺乏赤霉素的表型，提示了phga2ox1可能编码一个功能基因。