蓝猪耳胚珠磷脂酶c基因tfplc1启动子的克隆及载体构建

？应用衔接头pcr技术，以蓝猪耳全基因组dna分别经drai、ecorv、pvuii、smai消化后与衔接头连接产物为模板，用衔接头引物和tfplc1基因的特异引物经过多轮的巢式pcr，先后克隆到两个大小为798bp、813bp的tfplc1基因上游序列；经测序、blastn比较分析和拼接得到一个蓝猪耳tfplc1基因的启动子序列，共1432bp。序列分析表明它含有类似于tatabox和caatbox的元件，在其远端上游区域还有多个at富含区，而且还含有多个胚乳特异表达启动子的元件。将该启动子全序列和5’端缺失的700bp序列与pbi121分别构建了植物表达载体ppp1326和ppp700，用于转化蓝猪耳，以验证该启动子的功能。该启动子的克隆对于研究蓝猪耳胚珠tfplc1基因的表达调控及功能具有重要意义。