表达伪狂犬病毒gc糖蛋白基因重组腺病毒的构建及其免疫效果研究

？通过双酶切将伪狂犬病毒(pseudorabiesvirus,prv)fa株gc囊膜糖蛋白基因片断亚克隆到5型腺病毒admax系统穿梭质粒pdc316中，得到pdc316-gc。用此质粒与腺病毒dna辅助质粒pbhgloxδe1,3cre共转染293细胞,初步成功包装出重组腺病毒adv-gc。进一步通过pcr鉴定和病毒空斑纯化，得到纯的高效价adv-gc病毒液。间接免疫荧光实验证明此重组病毒能表达prvgc蛋白。该病毒经肌肉免疫balb/c小鼠,结果表明能诱导小鼠产生特异的体液和细胞免疫反应，即针对gc蛋白的总抗体igg、针对prv的中和抗体和足垫迟发型超敏反应dth。攻毒实验表明，此重组病毒能提供100％的免疫保护，而对照组为0%。表达prvgc基因复制缺陷型重组腺病毒的构建及其免疫效果的初步测试，为研制prv新型活载体疫苗奠定了基础。