红色荧光标记载体pbaca4dsred1的构建及其表达

？以首次克隆的家蚕bombyxmori肌动蛋白（actin4,a4）启动子、红色荧光蛋白基因dsred1和多聚腺苷酸识别序列sv40为元件，经多次克隆将其插入到piggybac转座载体中，构建成pbaca4dsred1转基因表达载体。将该载体显微注射到胚盘形成前期的蚕卵中，在荧光显微镜下观察其发光情况，结果发现：在胚胎早期发育的第三天，检测到蚕卵内发出较强的红色荧光。由于蚕卵没有红色自发荧光，用dsred1标记背景干扰小，对注射蚕种无特别选择，在荧光显微镜下观察到明显的红色荧光，表明pbaca4dsred1载体构建正确且能在蚕卵中表达。红色荧光蛋白(rfp)基因丰富了报告基因的种类，并且与绿色荧光蛋白(gfp)基因一样，可以作为理想的报告基因应用于家蚕的功能基因研究。