pbi121-lyz-gfp表达载体的构建及其对和田苜蓿愈伤组织的转化

？利用分子克隆技术，将gfp基因片段插入到pbi121-lyz多克隆区，构建了重组表达载体pbi121-lyz-gfp。经smai与bamhi双酶切和pcr验证重组质粒，均能得到约750bp的目的片段，通过进一步测序证明：gfp基因已成功连接到pbi121-lyz中，且重组质粒连接方向正确。利用冻融法将重组质粒导入农杆菌菌株lba4404，用叶盘法转化和田苜蓿，筛选出具有卡那霉素抗性的愈伤组织，经pcr扩增和荧光显微镜检测证明重组基因已成功转化到和田苜蓿愈伤组织中。