cry1ab敏感和抗性亚洲玉米螟氨肽酶n基因的克隆及序列差异分析

？研究亚洲玉米螟(ostriniafurnacalis)对cry1ab产生抗性的分子机理，对今后制定和实施合理的抗性治理策略具有重要的意义。本研究通过pcr方法克隆和测序，鉴定了cry1ab敏感-抗性亚洲玉米螟幼虫中肠氨肽酶n(apn)基因家族的一个成员ofapn3，其cdna全序列长3591bp，开放阅读框包括3045bp，编码1014个氨基酸。预测蛋白质分子量为115.1kd，等电点(pi)为4.44。其推导的氨基酸序列中具有鳞翅目昆虫氨肽酶典型结构特征，即n-末端具有18个氨基酸的剪切信号肽，谷氨酸锌化氨肽酶保守结构gamen，锌结合位点hexxhx18e，c-末端具有22个氨基酸的糖基磷脂酰肌醇(gpi)锚信号肽。系统分类归为第3支系。与欧洲玉米螟(ostrinianubilalis)的onapn3(genbank登录号：abl01483)同源性为96.6%。与cry1ab敏感亚洲玉米螟cdna相比，抗性品系的开放阅读框中有40个碱基发生了点突变，导致氨基酸序列中有10个氨基酸改变。其中ser735在抗性品系中突变为pro的现象在抗性棉铃虫apn3的氨基酸突变中也被检测到。鉴定的cry1ab敏感和抗性亚洲玉米螟品系的ofapn3cdna序列，已提交genbank，登录号分别是ef538427和eu137839。