水流动力学基因免疫制备猪ⅱ型圆环病毒核衣壳蛋白高效价抗血清

？为了建立一个简捷有效的抗血清的制备方法，本研究选用猪ⅱ型圆环病毒核衣壳蛋白基因，使用水流动力学基因免疫的方法制备高效价抗血清的可行性。应用无内提取试剂盒制备猪ⅱ型圆环病毒核衣壳蛋白基因真核表达载体pcdna-cap的无内毒素质粒。将该质粒使用水流动力学尾静脉注射法对小鼠(musmusculus)进行基因免疫，重复免疫5次后采血收集血清；以原核表达获得的n末端去除了核定位序列的猪圆环病毒核衣壳蛋白表达产物作为抗原蛋白，以制备的小鼠血清作为一抗进行酶联免疫吸附试验(elisa)和westernblot检测。结果显示，应用水流动力学尾静脉注射法获得抗血清稀释5000倍通过westernblot至少能够检测到10ng的抗原蛋白，elisa分析表明，其效价可达到1∶1000000，说明获得的抗血清具有很好的效价水平。这一研究为猪ⅱ型圆环病毒相关研究用抗体的制备提供了一个简洁有效的方法，也为猪ⅱ型圆环病毒的防治方法的建立提供了一个值得尝试的策略。