酵母单杂交方法初步鉴定甘蔗spsⅲ启动子区域调控序列

？蔗糖磷酸合成酶(sps,ec2.4.1.14)是植物糖分积累的关键酶基因，在甘蔗中其家族成员spsⅲ在成熟蔗茎中表达量高，是禾本科作物的特异成员。本研究应用酵母在甘蔗中单杂交系统，筛选spsⅲ5'侧翼－1410~－1181bp的光响应元件atct-motif和分生组织特异性元件cat-box的调控序列，获得了54个含有cdna片段的文库质粒，测序分析显示，14个cdna序列为非重复性。ncbi的blast同源性结果显示，除e1-3、e9-1和e0-3外，其余克隆都与甘蔗(saccharumspp.)近缘物种的蛋白有很高的同源性，达到90%以上。通过smart和sbase，对推演的氨基酸序列进行蛋白质功能结构域预测与分析，显示编号为e0-3、e2-3、f2-1、f4-2和g8-2的5个克隆对应的氨基酸序列具有转录因子特征结构域。研究结果为分离调控spsⅲ基因表达的转录因子提供了候选基因。