苜蓿根瘤菌聚羟丁酸解聚酶基因(phbd)突变体的构建及其特性

？:根据苜蓿根瘤菌(sinorhizobiummeliloti？)rm1021基因组中与ralstoniaeutrophaphaz基因同源部分序列设计1对引物，从s.meliloti基因组中用pcr扩增出835bpphbd基因片段并克隆到载体pgem?襆-teasy上；通过在phbd基因内插入ωsmsp和基因置换构建了phbd突变体。该突变体可积累比野生型菌株多1.0~2.6倍的聚羟丁酶（phb）。在yma和ty平板上形成非粘液型菌落，而在以乙酰乙酸或3-羟丁酸为唯一碳源的m9基本培养基（m9-aa，m9-hb）上形成粘液型菌落。碱性磷酸酶测定结果表明，通过接合引入phbd突变体菌株中的exof-phoa融合基因在ymb培养基中低量表达，而在m9-aa和m9-hb中高量表达。