农杆菌介导的蓝色基因转化中国水仙

？从矮牵牛(petuniahybrida)花瓣中分离得到编码蓝色基因f3’5’h(类黄酮3’,5’羟基化酶)的hf2基因(1527bp)，从牵牛(ipomoeanil)花瓣中分离得到dfr基因(二氢黄酮醇4－还原酶，1212bp)，将正向hf2片段和反向dfr片段连接到pbrlys双元载体质粒上，得到具有ubi(ubiquitin)组成型启动子的植物表达载体pubi-hf2-dfr。利用冻融法将双价重组质粒pubi-hf2-dfr导入农杆菌(agrobacteriumtumefaciens)菌株eha105中，菌落pcr鉴定农杆菌转化子。以中国水仙(narcissustazettavar.chinensis)愈伤组织为材料，进行遗传转化。ctab法提取130株中国水仙遗传转化再生苗的基因组dna，进行pcr和pcr-southernblot检测，获得3株阳性转基因植株。