嗜水气单胞菌外膜蛋白的原核表达及其对balb/c小鼠的免疫保护研究

？为确定嗜水气单胞菌（aeromonashydrophila，ah）as1.927株外膜蛋白omp的表达产物是否具有抗原性及测定对小鼠的免疫保护力，根据genbank上嗜水气单胞菌外膜蛋白ompa基因序列（登录号：af146597）设计1对引物，克隆出ompa全长基因（1020bp），经sali和xholi双酶切后连接pet-30a(+)，转化大肠杆菌（escherichiacoli）bl21，iptg诱导表达，经sds-page及westernblot分析鉴定。结果显示重组基因工程菌e.coli[pet-30a-ompa]表达的融合蛋白可以被鼠抗嗜水气单胞菌外膜蛋白抗血清识别，说明重组蛋白omp具有良好的免疫原性。将重组基因工程菌e.coli[pet-30a-ompa]口服免疫balb/c小鼠；末次免疫1周后对小鼠肠粘膜siga水平（放射免疫分析）的检测结果揭示：该重组基因工程菌能提高siga的分泌（p<0.05）；同时小鼠血清中测出特异性抗体（p<0.05）。末次免疫2周后用3.3×105cfu的ahas1.927（100ld50）腹腔注射攻击小鼠，重组蛋白对小鼠的相对免疫保护力（relativepercentsurvival，rps）为75%，表明重组基因工程菌可诱导小鼠产生一定的免疫保护作用。