牛体细胞核移植胚和孤雌激活胚的两步法体外培养

？：研究了牛体细胞核移植胚和孤雌胚在不同体外培养系统中的发育效果。结果显示：牛孤雌胚在培养液becmaa＋10％fbs中的囊胚发育率明显高于sofaa＋10％fbs或tcm199＋10％fbs（16.5%∶13.6%/12.8%,p＜0.05）；而在sofaa＋10％fbs中添加还原型谷胱甘肽（gsh）后，牛孤雌囊胚的发育率显著提高（18.5%∶12.8%,p＜0.01）。成纤维细胞生长因子4（fgf4）或胰岛素添加进无血清sofaa（含gsh）中，可明显提高牛体细胞核移植胚的囊胚发育率（8.7%/9.3%∶5.5%,p＜0.05），血清存在时，这两种生长因子无明显作用。依据上述结果及牛早期胚胎的代谢特征，以sof为基础液合成两组培养液分两步培养牛胚胎，即先用胚胎培养液ⅰ（sofnaa＋gsh＋edta＋insulin）培养72h，然后换用胚胎培养液ⅱ（sofaa＋gsh＋5％fbs＋葡萄糖＋insulin）继续培养，与对照组（sofaa＋gsh＋10％fbs一步培养）相比，牛孤雌胚和核移植胚的囊胚发育率都明显提高（22.3%∶18.5%;15.0%∶11.7%,p＜0.01），说明两步法培养体系更符合牛早期胚胎不同发育阶段的代谢特征和营养需求，是一种适宜的牛胚胎培养方法。